Conjugated & Membrane Proteins

Deterjanla çözünmüş membran proteinlerinin, proteini çevreleyen yüzey aktif madde miseli nedeniyle geleneksel tekniklerle veya hatta kütle spektroskopisiyle analiz edilmesi özellikle zordur. Denatüre edici SDS-PAGE, doğal oligomerleri ayrıştırır ve tanımlanmalarını engellerken, çapraz bağlı kütle spektroskopisi çözeltide bulunmayan oligomerler oluşturabilir.

Benzer şekilde, yoğun glikozillenmiş proteinler, küresel proteinler için referans standartları veya yaygın modellerle temsil edilemez ve bu nedenle geleneksel tekniklerle analize uygun değildir.

Bu zorluklar, SEC ayırma işleminden sonra üç dedektörden (UV, MALS ve diferansiyel kırılma indisi (dRI)) gelen verileri birleştirerek bir proteini ve ona bağlı deterjanı veya karbonhidratı ayırt edebilen çok açılı ışık saçılımı ile SEC'nin (SEC-MALS) birleştirilmesiyle aşılır. ASTRA'nın Konjugat Analizi algoritması, hem protein bileşeninin hem de konjuge veya misel bileşeninin molar kütlelerini hesaplar. Proteinin gerçek oligomerik veya kompleks hali ile glikozilasyon derecesi kesin olarak belirlenir.